熒光蛋白GFP發光原理:熒光蛋白髮光類型屬於斯托克斯位移型,其基本原理是生色團在較高能量的光子照射下發生構象的改變,從而導致分子能級變化,從高能級的構象躍遷向低能級時發出較低能量的光子。
生色團在發光過程中主要有兩種化學過程。
一是質子轉移,即質子化和去質子化,二是分子構象的改變。
它蛋白質序列裏的Ser65–Tyr66–Gly67構成了無需催化的發光分子。使用時一般用光線激發,395nm和475nm是兩個最大激發波長,發射波長在509nm。