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基因工程成功的關鍵

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基因工程成功的關鍵

一、什麼是基因工程工具酶,有什麼用?

基因工程的關鍵技術是DNA的連接重組。科學家根據分子遺傳學的發現,應用生物化學提取和鑑定酶的技術,找到了一系列基因工程的工具酶。基因工程使用的工具酶具有一個重要特徵:每一種酶都具有自身特定的功能。有的像"手術刀",可以進行DNA分子的特定切割有的像"粘合劑",可以促進DNA分子之間的粘合和連接有的像"砌磚機",可以合成完整的雙鏈DNA分子.基因工程常用的工具酶可分為:限制性內切酶、DNA連接酶、DNA片段末端修飾酶等。

限制性核酸內切酶,簡稱限制酶。它的發現和應用為從細胞基因組中分離目的基因提供了重要工具。限制酶能夠識別DNA大分子鏈上特定的核苷酸順序,並能在某一特定部位將DNA斷裂。這樣,目的基因便有可能完整地存在於某一DNA片段上,然後再把它們分離出來。在基因工程中,限制酶是一種必不可少的工具酶,是進行DNA分子切割的特殊工具.因此它有"分子剪刀"或"分子手術刀"之稱。

目前已經發現的限制酶多達20多種.每一種都有極強的特異性,可以準確無誤地進行核苷酸的識別,決不會錯切一刀。一般情況下,一種限制性內切酶能識別4-6個核苷酸序列。

為了便於DNA片段的連接往往用不同的酶對DNA片段末端進行修飾這種酶就是DNA片段末端修飾酶。

不同的DNA片段之間的連接需要另一種工具酶----連接酶的幫助.這種酶也是在細菌中發現的.如果説內切酶是對基因操作的"剪刀",那麼連接酶就是"漿糊"。

二、什麼是基因克隆載體?

目的基因在經過體外改造後,必須進人受體細胞內才能進行擴增和生物表達。但是用於DNA重組體的目的基因,不能直接引人受體細胞,因為每種生物都是長期進化的產物,具有很強的排他性.外源DNA如果單獨進人受體細胞,必將被破壞。因此,必須有一種運載基因的載體作媒介物,才能達到目的.載體在基因工程中的作用,就像過河時必須有船一樣.載體運載外源DNA進入受體細胞,是通過在載體自身的DNA核酸序列中插人外源DNA,再進人受體細胞內進行復制,在載體DNA複製時,外源DNA分子也獲得了擴增和表達。

目前經常使用的載體,有質體和病毒兩類.各種不同的載體,儘管分子量大小、結構和用途上存在着較大的差異,但是作為載體,它們應該具備一些共同的特性:

1、能在受體細胞內進行獨立和穩定的DNA自我複製.在其DNA插入外源基因後,仍然保持穩定的復

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