根據朗伯-比爾定律,A=εbc,其中A為吸光度,ε為摩爾吸光係數,b為吸收池厚度,c為濃度。A已知,ε可通過查閲相關文獻查得標準值,或者測定已知濃度的亞甲基藍標準溶液來求得,b可測得或查得廠家標稱的吸收池厚度(一般是1cm、2cm或4cm),於是僅有的未知項c可求得了