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耐熱DNA聚合酶-Taq酶的發現對於PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,並逐步應用於臨牀。
DNA的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。
在實驗中發現,DNA在高温時也可以發生變性解鏈,當温度降低後又可以復性成為雙鏈。因此,通過温度變化控制DNA的變性和復性,加入設計引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外複製。
但是,DNA聚合酶在高温時會失活,因此,每次循環都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價格昂貴,制約了PCR技術的應用和發展。