原理是通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇脱色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙。