大蛇丸首先是隱藏在藥師兜的身體裏,當藥師兜被擊敗後,左助喚醒了大蛇丸,並帶到宇智波一族的禁地,用祕術解開了死神封印的手,把四代火影的靈魂也解放了,順帶用穢土轉生召喚了1-4代的火影,其中三代火影猿飛日斬也因此出現與大蛇丸聯手,拯救木葉。