以植物轉基因為例:
1、載體構建:包括目的基因擴增,表達載體構建。
2、遺傳轉化:最簡單的花序浸染,常用的農桿菌轉化、基因槍轟擊,還有花粉管通道等。
3、陽性篩選:標記基因篩選,陽性植株目的基因DNA水平PCR檢測、RNA水平PCR檢測、目的基因表達蛋白水平檢測。
4、功能驗證:即表型分析(驗證轉基因是否在體內表達)。
第一步目的基因的獲取。
第二步目的基因與運載體結合。
第三部目的基因匯入受體細胞。
第四步,目的基因的檢測與鑑定。