1、雄性泄殖孔略小，周圍外凸，形成橢圓形的隆起圈雌性泄殖孔大，周圍向內凹陷。
2、雄性泄殖孔外有一圈不規則的小白點突起，雌體泄殖孔外無小白點突起。
3、解剖後可見：雄性泄殖孔內皮下有兩瓣杏黃色的泄殖腔腺體，圍成橢圓形，腺體能分泌一種膠絲狀的粘液，雌性無此腺體。
娃娃魚的雄性和雌性在外形上很難區分，只有在繁殖期通過泄殖孔的不同來進行辯認，雄性娃娃魚的泄殖孔內周有一圈突出的白色乳點，孔的周圍充血紅腫，桔瓣狀的肌肉隆起，而雌性泄殖孔的肌肉則比較鬆弛。
温馨提示：娃娃魚屬於野生保護動物，保護野生動物從自身做起，拒絕買賣野生動物製品，不干擾野生動物的自由生活。
成熟後娃娃魚大致有以下幾個方法可以分辨娃娃魚的公母。
1、從外觀上，成年雄性體型較大，雌性體形較小。
2、從活動上，雄體活潑靈敏，雌體腹部肥大，行動遲緩。
3、從生殖系統上，雄體泄殖腔孔隆起，特別在生殖季節，孔裂長，有明顯絨毛狀乳突，甚至向外凸出，而雌體的泄殖腔孔平伏，孔裂較短，無明顯乳突。
4、通過泄殖孔的不同來區分。雄性泄殖孔的內周有一圈突出的白色乳點，孔的周圍充血紅腫，桔瓣狀的肌肉隆起。雄性泄殖孔長， 左右各有一橢圓形的橘瓣狀隆起， 為其皮下的泄殖腔腺， 且在泄殖孔周圍有一圍明顯的白色顆粒狀突起。雌性泄殖孔略小， 無泄殖腔腺， 因此孔周圍無隆起， 亦無小顆粒，雌性泄殖孔的肌肉是鬆。
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