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克隆載體名詞解釋

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克隆載體名詞解釋

克隆載體通常採用從病毒、質體或高等生物細胞中獲取的DNA作為克隆載體,在載體上插入合適大小的 外源DNA片段,並注意不能破壞載體的自我複製性質。

將重組後的載體引入到宿主細胞中,並在宿主細胞中大量繁殖。

常見的載體有質體、噬菌粒、酵母人工染色體。

克隆載體的要求:

①能在宿主細胞中複製繁殖,而且最好要有較高的自主複製能力。

②容易進入宿主細胞,而且進入效率越高越好。

③容易插入外來核酸片段,插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點。

④容易從宿主細胞中分離純化出來,這才便於重組操作。

⑤有容易被識別篩選的標誌,當其進入宿主細胞、或攜帶着外來的核酸序列進入宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。

就是能夠通過限制性內切酶,將目的DNA片段整合進去,並且能夠轉入宿主細胞進行表達的生物DNA。 常見的有質體,病毒,噬菌體等。