消耗引物的公式:c1v1=c2v2。
10uM濃度的引物,加個1ul足矣。在PCR反應中,經過n次循環,理論上DNA鏈的數目擴增了2的n次方。PCR的一個循環,一個DNA模板被複製為2個DNA片段。PCR循環次數通常就是30左右。循環數太多了,雖然在一定程度上能夠提高產物量,但是由於反應時間過長。
PCR 技術大量擴增目的基因時,緩衝液中需要加入的引物個數計算公式為2n+1-2.因此,若將1個DNA分子拷貝10次,則需要在緩衝液中至少加入211-2個引物.