為什麼gc含量高就要提高退火温度

GC含量高，説明解鏈温度高，目的條帶在較高温度才會解鏈，而在未達到解鏈温度時，引物會以未完全解鏈的DNA為模板，進行PCR非特異性擴增，所以易出現非特異性條帶。

提高退火温度，DNA復性增加，減少非特異性互補機會，使非特異性條帶減少。

因為在化學結構中GC之間有三個氫鍵，而AT之間只有兩個氫鍵，因此GC含量越高，要打開氫鍵的能量就要求越大，即退火温度越高.

GC只能分析氣體，液體在毛細管中會發生堵塞。因此有機液體均要經過高温的汽化室變為氣體，然後被載氣帶入色譜柱和檢測器。因此要加高温而HPLC本來就是用高壓的溶劑帶着樣品去分離的，樣品和溶劑都要保持在液體狀態，當然不用要高温。否則不就汽化了嘛...