GC含量高,説明解鏈温度高,目的條帶在較高温度才會解鏈,而在未達到解鏈温度時,引物會以未完全解鏈的DNA為模板,進行PCR非特異性擴增,所以易出現非特異性條帶。
降低退火温度,DNA復性減緩,增加非特異性互補機會,使非特異性條帶增多。