想在目標基因中插入一段序列,主要通過一下步驟完成。
1、通過DNA內切酶將靶基因進行剪切,形成粘性末端
2、在目標基因兩段添加粘性末端,粘性末端可以和靶基因剪切過程中形成的粘性末端進行互補配對
3、在DNA鏈接酶的作用下封閉粘末端,完成插入。
該技術是常用分子生物學技術,被廣泛應用於生物工程等領域。